红色荧光染料pkh26走流式细胞仪的ApC吗

不能.这个荧光染料需要黄绿激光来激发(最大激发波长是551nm), 最强光谱在567. 所以在有黄绿激光的机器上,使用PE通道检测.

流式细胞仪检测的是相对荧光强度,任何生物大分子都会有本底荧光,只不过相对于荧光染料要弱的多.当激光照射没有染色的细胞时,细胞内的生物大分子就会发出多光谱的荧光.如果PMT上所加的电压足够大,看起来就是信号会比较强了.所以做实验的时候,要先用没有任何染色的细胞来设置阴性阈值,然后在相同的PMT电压下再检测其他样本,比较荧光的强弱.如果这是没有经过染色的细胞出现强信号,都是因为被染料污染所导致的.

可以一起用,两者的发射峰分得相当开,APC 660nm, APC-Cy7 785nm 应该不需要compensation. 注意你的仪器两者都能够读取.https://dev-gb.bdbioscience.com/research/multicolor/sampledata/red.jsp

这个不需要记忆的.每个荧光染料都有自己对应的激发激光和最强的释放荧光光谱.这个可以在网上查到,比如这个网页:https://www.bdbiosciences.com/sg/research/multicolor/spectrum_viewer/index.jsp 或者 https://www.thermofisher.com/us/en/

流式细胞仪数据分析5.1 数据采集及显示光信号转换成电压脉冲后,再通过模数转换器转换成为计算机能够储存处理的数字信号. 流式细胞仪的数据以FSC标准格式存储,该标准由“分析细胞学协会”制定.根据FSC标准,数据存储格式应包括

流式凋亡检测的方法很多.如果细胞只是自带红色荧光,那就用其他颜色的荧光染料来检测.比如检测caspase-3/7活性,底物可以用绿色荧光标记.如果是要做DNA单色,看sub-G1,那可以用DAPI.要测annexin V,也可以用绿色标记物加DAPI

1、通道是:利用miltenyi或其他公司的磁珠对目的细胞做预纯化或清洗可提高分拣效率.当然,仅仅利用一轮或多轮磁珠筛选而不用流式细胞仪,许多研究也能开展起来,但这不是本文讨论的重点.amnis 公司已将流式细胞仪射流与荧光显微镜

现在的机器都是自动调节,不过也要做好准备工作.我大致说一下原理.做补偿调节,需要以下的样本,无任何染色的样本,分别是FITC, PE, PerCP还有APC单染阳性的样本,所以你这里需要一共5个管子.在纯手工的年代,你需要画出这四个

流式细胞术中荧光补偿该如何调节?以FITC和PE为例来看光谱重叠.FITC单染管的荧光会部分漏到PE通道中,而这部分需要从PE通道中减掉溢漏过来的FITC荧光.那么荧光补偿该如何调节呢?l调节电压l检测荧光通道的自发荧光l每个荧光通道

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